本发明公开了一种丹参水提物及其制备方法。该丹参水提物的制备方法操作方便,适于工业化大规模生产,所得水提物中丹酚酸B的提取收率高,且有效降低了难除组分丹酚酸E的含量,利用该丹参水提物可以方便地制备高纯度的丹酚酸B。
1.一种丹参水提物,其特征在于,其中丹酚酸E的相对含量为0.4%以下。
2.如权利要求1所述的丹参水提物,其特征在于,其中丹酚酸E的相对含量为0.1~0.4%。
3.如权利要求2所述的丹参水提物,其特征在于,其中丹酚酸E的相对含量为0.2~0.3%。
4.如权利要求1~3任一项所述的丹参水提物,其特征在于,其中丹酚酸B的含量为67~90%。
5.如权利要求4所述的丹参水提物,其特征在于,其中丹酚酸B的含量为72~84%。
6.如权利要求1~5任一项所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于包含以下步骤:将丹参于pH为3.5~4.5的酸的水溶液中进行提取,即可。
7.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的丹参为经过粉碎后使用,粉碎后的粒径为30~200目。
8.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的酸为盐酸、草酸、醋酸和柠檬酸中的一种或多种。
9.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的酸的水溶液的pH为4.0。
10.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的酸的水溶液的用量为丹参体积的7~9倍。
11.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的提取的温度为70~80°C。
12.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的提取的时间为50~70分钟。
13.如权利要求6所述的丹参水提物的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包含下列步骤:丹参药材中加入7~9倍体积的水,用酸调pH至
3.5~4.5,在70~80°C下,提取50~70分钟,即可。
14.一种丹酚酸B的制备方法,其特征在于,将如权利要求1~5任一项所述的丹参水提物经过后处理提纯,即可。
15.如权利要求14所述的丹酚酸B的制备方法,其特征在于,所述的后处理方法包括如下步骤:(1)将丹参水提物进行生物转化;(2)将步骤(1)所得物质用反相树脂柱分离,即可。
16.如权利要求15所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的生物转化为用禾谷镰孢菌静息细胞进行转化,所述的生物转化的温度为20~35°C,所述的生物转化的时间为24~90小时;步骤(2)中所述的用反相树脂柱分离的洗脱液为水或甲醇水溶液。技术领域
本发明涉及一种丹参水提物及其制备方法。
背景技术
中药丹参来源于唇形科鼠尾草属植物丹参(Salviaxa0miltiorrhizaxa0Bunge)的干燥根及根茎。具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效,主要用于心脑血管疾病的治疗。研究表明,其中的活性成分具有抗血栓、抗血小板凝集、抗氧化、抗肿瘤等药理活性。丹参的活性成分可以分为水溶性和脂溶性两部分,其中水溶性部分是以丹酚酸B为代表的酚酸类化合物;脂溶性活性成分是以丹参酮IIA为代表的二萜菲醌类化合物。研究表明,丹酚酸B是丹参水溶性成分中含量最高、活性最强的化合物,以丹酚酸B为有效成分的药物开发也日益受到关注。丹参水溶性成分的分离纯化工艺虽起步较晚,但发展迅速。主要方法有水提醇沉法、高速逆流色谱法、CO₂超临界萃取法等。这些方法只能将丹酚酸B纯度和收率提高到较高水平(纯度约95%,收率约85%),难以制备纯品(纯度>99%)。本发明人在CN101638401A中公开了通过生物转化法和柱色谱法将丹酚酸B的纯度提高到99%以上,是目前关于丹酚酸B的分离纯化方法中纯度最高的研究成果。但是该方法仍难除去丹参水溶性成分中的低含量组分丹酚酸E,该杂质的存在阻碍了以丹酚酸B为有效成分的药物研究的进展。 ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服了现有技术中丹参水提物中丹酚酸B的含量不高、含有较多难除组分丹酚酸E的缺陷,提供了一种丹参水提物及其制备方法。该水提物中丹酚酸B的提取收率高,且有效降低了难除组分丹酚酸E的含量,利用该丹参水提物可以方便地制备高纯度的丹酚酸B。因此,本发明涉及一种丹参水提物,其中,丹酚酸E的相对含量为0.4%以下,如0.1%~0.4%;较佳的为0.3%以下,如0.2%~0.3%。其中,丹酚酸B的含量一般为67~90%;较佳的为72~84%。其中,所述的丹酚酸E的相对含量(%)=丹参水提物中丹酚酸E的含量/(丹参水提物中丹酚酸B的含量+丹参水提物中丹酚酸E的含量)×100%。本发明进一步涉及上述丹参水提物的制备方法,该方法包含以下步骤:将丹参于pH为3.5~4.5的酸的水溶液中进行提取,即可。其中,所述的酸较佳的为盐酸、草酸、醋酸和柠檬酸中的一种或多种,更佳的为盐酸。所述的酸的水溶液的pH较佳的为4.0。所述的酸的水溶液的用量较佳的为丹参体积的7~9倍,更佳的为8倍。本发明的方法中,其他条件可采用现有丹参水提物制备方法的常用条件,优选条件如下:其中,所述的丹参较佳的为丹参药材。所述的丹参较佳的为经过粉碎后使用,粉碎后的粒径较佳的为30~200目;更佳的为50目。其中,所述的提取的温度较佳的为70~80°C,更佳的为75°C。其中,所述的提取的时间较佳的为50~70分钟,更佳的为60分钟。本发明中,最佳的,所述的丹参水提物的制备方法包含下列步骤:丹参药材中加入7~9倍体积的水,用酸调pH至3.5~4.5,在70~80°C下,提取50~70分钟,即可。其中,所述的水的用量较佳的为丹参药材体积的8倍。所述的pH较佳的为4.0。所述的酸较佳的为盐酸。所述的酸的浓度较佳的为1mol/L。所述的提取的温度较佳的为75°C。所述的提取的时间较佳的为60分钟。本发明进一步涉及由上述方法制得的丹参水提物。本发明还涉及一种丹酚酸B的制备方法,将上述制得的水提物经过后处理提纯,即可。其中,所述的后处理的方法可为现有文献报道过的方法或者本领域常规的针对丹参水提物进行的后处理方法。较佳的,可参见CN101638401A。所述的后处理方法较佳的包括如下步骤:(1)将丹参水提物进行生物转化;(2)将步骤(1)所得物质用反向树脂柱分离,即可。其中,步骤(1)和步骤(2)中的各技术特征的适用范围和优选范围可参见CN101638401A说明书第1页倒数第4行至第2页最后一行中的记载。本发明的一较佳实例中,步骤(1)中所述的生物转化较佳的为用禾谷镰孢菌静息细胞进行转化;所述的生物转化的温度较佳的为20~35°C;所述的生物转化的时间较佳的为24~90小时;步骤(2)中所述的用反相树脂柱分离的洗脱液较佳的为水或甲醇水溶液。在符合本领域常识的基础上,本发明中上述各优选技术特征可任意组合,即得本发明各较佳实例。本发明中所述原料或试剂除特别说明之外,均市售可得。本发明的积极进步效果在于:本发明的丹参水提物制备方便,适于工业化大规模生产,该水提物中丹酚酸B的提取收率可达92%以上,且有效降低了难除组分丹酚酸E的含量,从而为制备高纯度的丹酚酸B提供了有利条件。
附图说明
图1为实施例1所得水提物的HPLC谱图。
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明,但本发明并不受其限制。实施例中所用的原料或试剂除特别说明之外,均市售可得。丹参药材:购自河南南阳中药材市场,粉碎过50目筛备用。丹酚酸B对照品:自制,纯度≥99%。HPLC检测条件:色谱柱:Agilentxa0C18反相色谱柱(5μm,250×4.6mm);柱温:40°C;流动相:甲酸水溶液(质量百分比0.5%)∶乙腈=4∶1(体积比);流速:1ml/min;进样量:10μl;检测波长:288nm。在上述检测条件下,丹酚酸B和丹酚酸E的保留时间分别为31.5min、33.8min。药材中丹酚酸B的质量百分含量按照《中华人民共和国药典》(2005版)中药部关于丹参药材中丹酚酸B含量测定的方法测得。即:色谱条件与系统实用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)为流动相;检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量,加75%甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液,即得。供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入75%甲醇50ml,称定重量,加热回流1小时,取出,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。经上述方法测定,本试验所用的药材中丹酚酸B的百分含量为3.6%。本发明中,丹酚酸B的提取收率的计算方法如下: ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 其中, ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/> 药材中丹酚酸B的含量(mg)=药材中丹酚酸B的百分含量×试验所用的药材质量实施例中,水提物中丹酚酸E的相对含量(%)=水提物中丹酚酸E的含量/(水提物中丹酚酸B的含量+水提物中丹酚酸E的含量)×100%,相应的,可以通过水提物的HPLC检测结果中二者的峰面积计算得到。最终得到丹酚酸B的收率=(提取工艺流程最终得到的高纯度丹酚酸B的质量/提取初始时丹参药材中丹酚酸B的质量)×100%实施例1称取10g丹参粉末,加入70ml水,用1mol/L的盐酸调pH至3.5,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为79.463%和0.202%(结果见图1);计算水提物中丹酚酸B的提取收率为92.1%,丹酚酸E的相对含量为0.253%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.234g,纯度为99.7%、收率为65%。实施例2称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的盐酸调pH至3.5,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为81.191%和0.164%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为92.3%,丹酚酸E的相对含量为0.202%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.241g,纯度为99.5%、收率为67%。实施例3称取10g丹参粉末,加入90ml水,用1mol/L的草酸调pH至3.5,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为75.261%和0.182%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为92.6%,丹酚酸E的相对含量为0.241%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.245g,纯度为99.4%、收率为68%。实施例4称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的盐酸调pH至4.0,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为80.798%和0.172%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.3%,丹酚酸E的相对含量为0.213%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.252g,纯度为99.8%、收率为70%。实施例5称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的醋酸调pH至4.5,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为72.903%和0.201%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.5%,丹酚酸E的相对含量为0.274%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.227g,纯度为99.8%、收率为63%。实施例6称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的盐酸调pH至4.0,于70°C水浴中提取65min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为72.376%和0.147%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为92.5%,丹酚酸E的相对含量为0.203%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.256g,纯度为99.9%、收率为71%。实施例7称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的盐酸调pH至4.0,于80°C水浴中提取65min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为75.407%和0.220%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.7%,丹酚酸E的相对含量为0.291%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.248g,纯度为99.6%、收率为69%。实施例8称取10g丹参粉末,加入70ml水,用1mol/L的柠檬酸调pH至4.0,于75°C水浴中提取60min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为83.228%和0.194%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.1%,丹酚酸E的相对含量为0.232%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.241g,纯度为99.5%、收率为67%。实施例9称取10g丹参粉末,加入70ml水,用1mol/L的盐酸调pH至4.0,于75°C水浴中提取65min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为74.807%和0.176%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.5%,丹酚酸E的相对含量为0.235%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.263g,纯度为99.8%、收率为73%。实施例10称取10g丹参粉末,加入70ml水,用1mol/L的盐酸调pH至4.0,于75°C水浴中提取70min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为80.102%和0.207%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为93.7%,丹酚酸E的相对含量为0.258%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.266g,纯度为99.7%、收率为74%。对比例1(与CN101638401A中的方法比较)称取10g丹参粉末,加入40ml水,于90°C水浴中提取两次,过滤,合并两次滤液,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为66.808%和0.510%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为89.7%,丹酚酸E的相对含量为0.758%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.187g,纯度为97.4%、收率为52%。由对比例1可以看出,不同的提取方式对水提物中丹酚酸B的提取收率、丹酚酸E的相对含量均有较大影响,丹酚酸E的相对含量将显著影响最终产品丹酚酸B的纯度和收率。对比例2称取10g丹参粉末,加入80ml水,用1mol/L的盐酸调pH至1.0,于75°C水浴中提取65min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为63.224%和0.225%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为73.5%,丹酚酸E的相对含量为0.354%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.191g,纯度为87.4%、收率为53%。对比例3称取10g丹参粉末,加入70ml水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调pH至10.0,于75°C水浴中提取65min,过滤,测定水提物中丹酚酸B和丹酚酸E的HPLC纯度分别为63.272%和2.260%,计算水提物中丹酚酸B的提取收率为69.4%,丹酚酸E的相对含量为3.452%。将上述水提物用1mol/L的盐酸调pH至2.0,用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,减压浓缩除去乙酸乙酯,残余物中加入200mlxa0pH为7.0的磷酸缓冲液溶解,加入20g禾谷镰孢菌湿菌体,在28°C生物转化36小时,去除迷迭香酸,再用树脂XAD-2吸附,先用5倍柱体积的水洗脱除杂,再用体积浓度45%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至保留时间小于丹酚酸B的杂质完全去除,再用体积浓度55%的甲醇水溶液洗脱树脂柱至丹酚酸B洗脱完全,收集HPLC纯度大于99%的洗脱液,最终得到丹酚酸Bxa00.162g,纯度为80.8%、收率为45%。由对比例2、3可以看出,提取液pH的改变会显著影响水提物中丹酚酸B的提取收率和丹酚酸E的相对含量。提取液的pH过低时,酸性环境不利于水溶性成分的溶出;提取液的pH过高时,丹酚酸B在强碱性条件下不稳定,易被破坏。因此提取液pH过高或过低都不利于高收率高纯度丹酚酸B的获得。